甘露聚糖結合凝集素的分離純化及其與單糖配體的結合活性鑒定

摘要: 從羊血清中分離純化甘露聚糖結合凝集素(MBL ) ,并研究其與單糖配體的結合活性, 為進一步研究MBL 與病原微生物的識別結合活性提供研究基礎。用甘露聚糖2Sepharose 4B 親和柱行親和層析, 從羊血清中分離純化出MBL 分子, 行還原性SDS2PAGE 測定其分子量。用VII 型膠原酶鑒定其膠原樣結構。用酶聯凝集素試驗( ELLA) 鑒定其與單糖配體的結合活性。得到純化的羊血清MBL 分子有兩種單體, 相對分子質量分別為29 000 和33 000。羊血清MBL 具有膠原樣結構, 可以被膠原酶消化。羊血清MBL 與辣根過氧化物酶表面糖鏈中甘露糖的結合受N2乙酰葡糖胺、L2巖藻糖、D2氨基葡糖、N2乙酰氨基半乳糖不同程度的抑制。MBL 與單糖配體的結合活性預示了其潛在的與表面富含這些糖基結構的病原微生物的識別結合能力。