熒光法操作步驟
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下一篇 2012-07-01 17:36:18
內容摘要:加入正己烷溶解殘渣,定容到10 mI再吸收40 mL乙醚,充分振搖2 min,靜止分層。醚層移至500
mL分液漏斗中。如此萃取4次,合并醚液,用等量水多次洗至中性,將醚液通過無水硫酸鈉脫水后,在氮氣流、真空下蒸干。加入正己烷溶解殘渣,定容到10 mI,再吸取1
mL,定容到10 mL。
①樣品處理:準確稱取油樣0.50 g(樣品中含維生素E<0.2 mg)置于圓底燒瓶中,加維生素C O.9 g,無水乙醇12
ml。,接好冷凝器,在水浴上加熱。當瓶內液體開始沸騰時,加入3 mL氫氧化鉀水溶液。15 min后將瓶在水流中迅速冷卻。隨即加入40
mL蒸餾水使皂化物溶解,并移入250 mL分液漏斗中。加入40 mL乙醚,充分振搖2 min,靜止分層。醚層移至500
mL分液漏斗中。如此萃取4次,合并醚液,用等量水多次洗至中性,將醚液通過無水硫酸鈉脫水后,在氮氣流、真空下蒸干。
加入正己烷溶解殘渣,定容到10 mI再吸收40 mL乙醚,充分振搖2 min,靜止分層。醚層移至500
mL分液漏斗中。如此萃取4次,合并醚液,用等量水多次洗至中性,將醚液通過無水硫酸鈉脫水后,在氮氣流、真空下蒸干。加入正己烷溶解殘渣,定容到10 mI,再吸取1
mL,定容到10 mL。
②熒光測定:儀器工作條件(溶劑為正己烷時,溶劑不同時,激發波長和發射波長不同)。激發波長:295 nm;發射波長:324
nm。激發狹縫:3;發射狹縫:2;靈敏度:0.3×7。根據以上條件,分別測定a一維生素E標準使用液和樣品溶液的熒光強度。
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