熒光法操作步驟

　　內容摘要：加入正己烷溶解殘渣，定容到10 mI再吸收40 mL乙醚，充分振搖2 min，靜止分層。醚層移至500 mL分液漏斗中。如此萃取4次，合并醚液，用等量水多次洗至中性，將醚液通過無水硫酸鈉脫水后，在氮氣流、真空下蒸干。加入正己烷溶解殘渣，定容到10 mI，再吸取1 mL，定容到10 mL。

　　①樣品處理：準確稱取油樣0.50 g(樣品中含維生素E<0.2 mg)置于圓底燒瓶中，加維生素C O.9 g，無水乙醇12 ml。，接好冷凝器，在水浴上加熱。當瓶內液體開始沸騰時，加入3 mL氫氧化鉀水溶液。15 min后將瓶在水流中迅速冷卻。隨即加入40 mL蒸餾水使皂化物溶解，并移入250 mL分液漏斗中。加入40 mL乙醚，充分振搖2 min，靜止分層。醚層移至500 mL分液漏斗中。如此萃取4次，合并醚液，用等量水多次洗至中性，將醚液通過無水硫酸鈉脫水后，在氮氣流、真空下蒸干。

　　加入正己烷溶解殘渣，定容到10 mI再吸收40 mL乙醚，充分振搖2 min，靜止分層。醚層移至500 mL分液漏斗中。如此萃取4次，合并醚液，用等量水多次洗至中性，將醚液通過無水硫酸鈉脫水后，在氮氣流、真空下蒸干。加入正己烷溶解殘渣，定容到10 mI，再吸取1 mL，定容到10 mL。

　　②熒光測定：儀器工作條件(溶劑為正己烷時，溶劑不同時，激發波長和發射波長不同)。激發波長：295 nm;發射波長：324 nm。激發狹縫：3;發射狹縫：2;靈敏度：0.3×7。根據以上條件，分別測定a一維生素E標準使用液和樣品溶液的熒光強度。