耐熱過氧化氫酶基因工程菌的構建及其發酵條件

摘　要: 利用PCR 擴增技術以嗜熱脂肪芽孢桿菌IAM11001 染色體DNA 為模板,擴增得到嗜熱脂肪芽孢桿菌過氧化氫酶編碼基因perA。再與經EcoR Ⅰ酶切的溫控表達載體pBV220 連接,構建重組質粒,并轉化宿主大腸桿菌JM109 ,得到耐熱過氧化氫酶基因工程菌,然后對該工程菌在LB 培養基和半合成培養基中的發酵條件進行了優化。結果表明:在LB 培養基中,誘導時期和酶合成最佳誘導時間均為5 h ,最大產酶量達到72. 9 U/ mL ;在半合成培養基中,于30 ℃培養4 h ,再于42 ℃誘導培養6 h ,產酶量最高達到131 U/ mL 。