A 鏈21 位Asn 缺失胰島素的分離純化及性質研究

摘要:將A21 位缺失胰島素原基因直接克隆到溫度誘導型表達載體pBV220 上,在E. coli 系統中得到高效表達,表達量為8 % - 15 %。表達產物經過超聲波破碎或高壓勻漿,包涵體裂解,等電點沉淀、二硫鍵還原及A ,B 鏈重組等后加工過程后,得到高純度的突變胰島素原。用酶切的方法將其活化為A21 位缺失胰島素,并進行性質和活性測定,證明其免疫活性和受體結合活性均大幅下降。因此認為A21Asn 在維持胰島素發揮其生物功能所必
須的特定空間結構方面有重要作用,A21Asn 是不可缺失的。