GL_7ACA酰化酶基因工程菌_E_col_省略_21_DE3_pYW_GA_發

探索了組成型重組大腸桿菌 E. coliBL21 DE3 pYW2GA高效表達 GL27ACA酰化酶 EC. 3. 1. 5. 11 的發酵工藝.在搖瓶培養獲得 GL27ACA酰化酶工程菌的最佳發酵條件的基礎上 ,用 5L自控發酵罐進行分批補料培養 ,為減少細菌代謝過程中有害的物質 主要是乙酸 的產生及酶的高效表達 ,發酵過程中采用不同的流加方式進行補料 ,同時對轉速和溶氧等進行控制.考察了恒速流加、pH反饋流加和指數流加幾種補料模式 ,比較得出菌濃最高的是 pH8. 0反饋流加這一模式 ,OD 可達 35,而酶活最高的模式是 pH7. 0反饋流加 ,最高酶活可達 3 463. 8 U/L.大腸桿菌 E. coliBL21 DE3 pYW2GA高效表達 GL27ACA酰化酶的發酵工藝的建立為工業化生產 GL27ACA酰化酶和頭孢類抗生素提供了基礎.