大鼠胰島細胞的分離純化及培養

【摘要】　目的　探討大鼠胰島細胞分離純化和培養的方法。方法　采用胰導管逆行灌注Hanks 液分離成年大鼠胰島, Ⅴ型膠原酶消化,不連續密度梯度Ficoll 400 純化胰島。用臺盼藍和雙硫腙染色檢測胰島活性和純度,葡萄糖刺激胰島素釋放試驗檢測胰島功能。結果　胰島細胞的收獲量為540 ±150 個胰島P胰腺,活性> 90 % ,純度>90 % ,高糖刺激后胰島素釋放量為低糖刺激的2 倍多。結論　胰導管灌注Hanks 液, Ⅴ型膠原酶消化和不連續密度梯度葡聚糖純化胰島,可以獲取數量多,活性和純度好的胰島。