植物乳桿菌乳酸脫氫酶的分離純化工藝研究

摘要: 為進一步研究植物乳桿菌乳酸脫氫酶的酶學性質,探討了乳酸脫氫酶的分離純化工藝.采用了硫酸銨沉淀、DEAE Sepharose F. F. 離子交換層析、Phenyl Sepharose 6 F. F. 疏水層析及Sephadex G—25 Fine 凝膠過濾等純化方法,確定了較為合理的純化工藝. 酶蛋白純化倍數達到21. 4 倍,酶活回收率為53. 9 % ,為以后乳酸脫氫酶的進一步純化提供了一定基礎. 高效液相色譜和SDS PAGE 電泳初步表明:乳酸脫氫酶相對分子質量為80 000 ,含有2 個亞基,且每個亞基相對分子質量大致為39 000。