雞血清載脂蛋白A Ⅰ的分離純化及其抗血清的制備

摘要: 用磷鎢酸沉淀制備雞血清HDL ,乙醇2丙酮混合液(體積比為1 ∶1) 脫脂后采用DEAESep harose CL26B 離子交換柱層析法分離雞血清apoA Ⅰ,分離獲得的apoA Ⅰ在尿素2SDS2PA GE電泳中呈現單一條帶,其分子質量約為27 788 u 。將提取的apoA Ⅰ對新西蘭雄兔進行多次免疫,制備得兔抗雞apoA Ⅰ抗血清,其效價為1 ∶16 。在免疫電泳和雙向免疫擴散試驗中抗血清均只呈現1 條清晰沉淀帶。試驗結果表明,用磷鎢酸沉淀法制備兔抗雞apoA Ⅰ抗血清,過程簡便,時間短且分離效果好。