草魚堿性磷酸酶的分離純化與部分性質研究

摘要: 用Tris2HCl 緩沖液抽提,硫酸銨分級沉淀,DEAE2纖維素和葡聚糖凝膠層析,從草魚腸中提取出堿性磷酸酶(AL P) . 提取倍數為6. 74 ,比活為684 U/ mg 蛋白. 酶液經PA GE 呈現單一帶,該酶催化對硝基苯磷酸二鈉(pNPP) 水解反應的最適p H 值為10. 41 ,最適溫度為27 ℃, Km 值為1. 01 mmol/ L ,酶的熱穩定性與p H 穩定性研究表明:該酶在p H 6. 6～11. 5 區間和在溫度低于45 ℃下穩定. 研究金屬離子對酶活力影響的結果表明:一價金屬離子Li + 、Na + 和K+ 對酶活力沒有影響;二價金屬離子Mg2 + 、Mn2 + 和Co2 + 對酶有不同程度的激活作用;Zn2 + 對酶有抑制作用。