DNS比色法測定還原糖和總糖

　　還原糖和總糖的測定

　　(3,5-二硝基水楊酸比色法)

　　一、實驗目的

　　1、掌握還原糖和總糖測定的基本原理

　　2、學習比色法測定還原糖的操作方法和分光光度計的使用

　　二、實驗原理

　　還原糖的測定是糖定量測定的基本方法。

　　還原糖是指含有自由醛基或酮基的糖類。單糖都是還原糖，雙糖和多糖不一定是還原糖，例如乳糖和麥芽糖是還原糖，蔗糖和淀粉是非還原糖。利用各種糖的溶解度不同，可將植物樣品中的單糖、雙糖和多糖分別提取出來。對非還原性的雙糖和多糖，可用酸水解法使其降解成還原性單糖進行測定，再分別求出樣品中還原糖和總糖的含量(常以葡萄糖含量計)。

　　還原糖在堿性條件下加熱可被氧化成糖酸及其它產物，而氧化劑3,5-二硝基水楊酸則被還原為棕紅色的3-氨基-5-硝基水楊酸。在一定范圍內，還原糖的量與棕紅色物質顏色的深淺成正比關系，利用分光光度計在540nm波長下測定光密度值，查對標準曲線并計算，便可求出樣品中還原糖和總糖的含量。由于多糖水解為單糖時，每斷裂一個糖苷鍵需加入一分子水，所以在計算多糖含量時應乘以系數0.9。