蛋白質 重組人FKBP12 的鑒定 液相色譜-串聯質譜法

本方法適用于分子量小于100000U 的蛋白質的鑒定。原理：電噴霧電離質譜法ESI-MS 在大氣壓下通過強電場的作用使樣品以液相方式與流動相一起形成一股細小的高度帶電的小液滴電噴霧源處的電勢比反相電極高很多離子以氣流形式通過反相電極上的小孔進入質譜儀內在四極質譜中進行分離分析由于使用軟電離方式樣品分子不碎裂在質譜圖中只出現分子離子峰毛細管液相色譜與串聯質譜聯接應用毛細管液相色譜將蛋白質的胰蛋白酶降解產物進行分離每一肽段相繼進入電噴霧串聯質譜儀由串聯質譜儀分別鎖定肽段經碰撞活化池活化產生碎片綜合各個肽段的碎片產生一個碎片峰列表文件用此文件在相應的數據庫上檢索可確定蛋白質的歸屬。