去污的效果可用去污因子K或去污率β表示:式中,A前和A后分別為去污前后污染物的放射性活度值。多種去污方法聯用時,總去污因子是各單種方法去污因子的乘積。K總=ⅡKi? ? ? ?(一)去除污染的方法因沾污的情況,被沾污表面的特點有所不同,去除污染的方法也各異,很難規定一種通用的方法,一般應先用水清洗去污,固水是最常用、最普通的去污劑,若不能達到要求時,再根據不同情況采用不同的洗液及方法。...
因為在增溶過程中脂質與受體一樣結合去污劑,因此去污劑和膜的比例會決定受體周圍去污劑和脂質結合的量。在純化的過程中脂質和去污劑的結合量會發生改變。增溶的過程必須優化,使其能夠在維持溶液中特定 GPCR 最穩定的同時得到最高的提取效率。通過放射性配體結合分析和總蛋白質含量測定,可以監測去污劑對加人的膜的系統變異 (systematicvariation) 效應。...
對于具有親水性而不會摻人空的去污劑膠束的標記配體,放射配體結合分析的效果最好。相反, 疏水性的配體會插入空去污劑膠團而導致非特異的高背景信號。 推薦使用氨基黑分析法 (amidoblackassay)(SchaffnerandWeissmann,1973) 檢測蛋白質的含量。在去污劑和配體存在的條件下, 許多檢測蛋白質含量的方法不準確。...
(2)去污劑處理:去污劑處理的目的是增加組織的通透性,利于雜交探針進入組織細胞,最常應用的去污劑是Triton X-100。注意:過度的去污劑處理不僅影響組織的形態結構,而且還會引起靶核酸的丟失。 (3) 蛋白酶處理:蛋白酶消化能使經固定后被遮蔽的靶核酸暴露,以增加探針對靶核酸的可及性。...
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