NY/T 560-2018
小鵝瘟診斷技術
Diagnosis technique of gosling plague
NYT560-2018, NY560-2018
標準修訂背景與技術演進
NY/T 560-2018替代2002版標準，主要技術升級包括：新增PCR檢測和免疫熒光方法，將間接ELISA優化為夾心ELISA，合并鵝胚與番鴨胚接種流程。本標準由揚州大學聯合中國動物疫病預防控制中心修訂，反映近16年小鵝瘟診斷技術發展。
核心診斷方法對比
| 方法 | 2002版 | 2018版 | 靈敏度提升 |
|---|---|---|---|
| 病毒分離 | 鵝胚/番鴨胚分別接種 | 合并接種流程 | 操作效率+30% |
| 血清學檢測 | 間接ELISA | 夾心ELISA | 特異性↑15% |
| 核酸檢測 | 未包含 | 新增PCR方法 | 檢出限達102 copies/μL |
關鍵技術操作要點
病毒分離規范
需使用12日齡無抗體鵝胚，接種后觀察典型病變：絨毛膜增厚、全身出血點及胚體發育停滯。注意24小時內死亡胚胎需廢棄。
PCR檢測流程
- 樣本處理：56℃水浴40分鐘蛋白酶K消化
- 引物設計：靶向VP3基因（776bp產物）
- 循環參數：94℃變性1min→50℃退火1min→72℃延伸2min
實施建議與質控要求
實驗室配置建議
- 二級生物安全柜用于病毒分離
- PCR實驗室需嚴格分區（試劑準備/樣本處理/擴增區）
- 熒光顯微鏡要求490nm激發濾光片
質控關鍵節點
ELISA試驗要求陽性對照OD450≥0.8，陰性對照≤0.2；PCR必須設置空白對照和陽性對照（SYG61株）。
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- 標準號
- NY/T 560-2018
- 別名
- NYT560-2018
NY560-2018 - 發布
- 2018年
- 總頁數
- 19頁
- 發布單位
- 行業標準-農業
- 當前最新
- NY/T 560-2018
- 被代替標準
- NY/T 560-2002
NY/T 560-2018 中可能用到的儀器設備
專題
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