ASTM F2149-01(2007)
細胞自動分析的標準試驗方法.單細胞懸浮液計數和分級的電敏域法

Standard Test Method for Automated Analyses of Cells-the Electrical Sensing Zone Method of Enumerating and Sizing Single Cell Suspensions

被代替

標準號

ASTM F2149-01(2007)

發布

2001年

發布單位

美國材料與試驗協會

替代標準

ASTM F2149-16

當前最新

ASTM F2149-16

 

 

適用范圍

該測定用于大學組織培養實驗室、政府研究以及醫院、生物醫學和制藥實驗室，以自動進行細胞計數和大小測定。該儀器可為任何組織培養設施提供非常快速、準確且精確的結果。此外，如上所述，由于儀器要分析的細胞大小是由用戶設置的，因此實際上可以對任何細胞種類和細胞類型進行分析；它不限于人體細胞或血細胞。電感應區方法于 20 世紀 50 年代中期引入 (9)。從那時起，已經有了重大改進，提高了操作員的易用性。其中包括取消水銀壓力計、縮小尺寸、提高自動化程度以及提供全面的統計計算機程序。與使用標準計數室、血細胞計數器進行的手動細胞計數相比，該儀器可提供快速結果。據了解，計數室的誤差為 10% 至 30%，而且非常耗時 (10)。此外，在對豬肝細胞進行計數和大小測定時，Stegemann 等人得出結論，與傳統的顯微鏡或基于細胞團的方法相比，自動化電傳感區方法在計數和大小方面提供了顯著更高的準確度、精密度和速度(7).1.1 如果了解其局限性，本測試方法涵蓋了大多數所有細胞類型的計數和尺寸分布的測量程序。該儀器允許用戶選擇細胞大小設置，因此，該測試方法不限于特定細胞類型。該方法適用于懸浮以及貼壁細胞培養 ()。這是一種定量實驗室方法，不適用于在線或現場使用。結果可以報告為每毫升細胞數或每體積分析的細胞懸浮液的細胞總數。計數和尺寸分布都可以用細胞微米直徑或體積、飛升來表示。
1.2 常規分析組織工程醫療產品中常用的細胞()。例如軟骨細胞 ()、成纖維細胞 () 和角質形成細胞 ()。 Szabo 等人使用該方法測量胰島數量和體積 ()。此外，使用電傳感區技術的儀器用于對放入中空纖維盒體外肝臟輔助系統中的豬肝細胞進行計數和大小分布分析。在這項研究 () 和其他研究 (, ) 中，與傳統的手動方法（使用血細胞計數器在顯微鏡下進行視覺細胞計數）相比，自動電感應區方法明顯得到驗證，具有更高的準確度和精確度。該驗證已在多種細胞類型中得到證實。此外，自動化程序快速、堅固且具有成本效益；它還最大限度地減少了手動技術中操作員之間固有的差異。
1.3 該儀器由多家公司制造；然而，所有的原理都是電阻抗。這種用于細胞計數和尺寸測定的測試方法基于對懸浮在導電液體中的細胞穿過小孔時產生的電阻變化的檢測和測量（參見 ()）。當細胞懸浮在導電液體（例如磷酸鹽緩沖鹽水）中時，它們充當離散絕緣體。當細胞懸浮液通過一個小的圓柱形孔時，每個細胞的通過會改變位于孔兩側的兩個浸沒電極之間的電氣路徑的阻抗。 ......

專題

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