實驗概要本方法是先將凝膠緊貼于一塊硝酸纖維濾膜,然后再將這種夾層組合直接置于兩個乎板電極之間,采用這種半干方法可將蛋白質從凝膠中轉印至硝酸纖維素膜上。平板可以是石墨(這種平板較便宜,但使用100次后必須更換)制成的,也可以是鉑金的(這種子板價格較貴,但使用壽命較長)。通過電洗脫將蛋白質從凝膠中轉印至...
半干轉是否要去膜、濾紙、膠同樣大小,因為膠大小不一定規則,膜和濾紙會大一點,那樣會不會短路?可以相等,但是如果紙、膜比凝膠大就比較容易形成短路了,上下兩層濾紙也不能因過大而相互接觸,這樣會短路,電流不會通過膠和濾紙。轉移前和轉移過程中看看電壓就行,正常的半干轉是慢慢變高的,最后結束時一般是開始的...
以WEALTEC的YRDIMES半干轉膜儀為例,首先確認是轉蛋白質還是核酸。蛋白質可參考Bjerrum and Schafer-Nielsen或Towbin或Dunn緩沖液系統配置緩沖液,電泳后將凝膠浸入緩沖液平衡5分鐘,將轉印膜和濾紙裁切并浸入緩沖液,合上上蓋,按說明書墊上BP-C紙,普通轉印1或...
一.簡介美國Bio-Rad公司的Trans-Blot SD型半干轉印系統是在電場的作用下把聚丙烯酰胺凝膠或瓊脂糖凝膠上的蛋白或核酸條帶轉移到硝酸纖維素膜上,其運用了電泳檢測的方法,使得蛋白或核酸從凝膠中進行分離轉移到硝酸纖維素膜上,由于硝酸纖維素膜的可支撐性,使得蛋白或核酸條帶能夠在電泳后繼續做...
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