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  • SN/T 5145.2-2019
    出口食品及飼料中動物源成分快速檢測方法 第2部分:貂成分檢測 PCR-試紙條法

    Rapid detection method for animal-derived ingredients in exported food and feed Part 2: PCR-test strip method for detection of mink ingredients

    SNT5145.2-2019, SN5145.2-2019


    標準技術背景

    本標準作為進出口食品安全檢測系列標準的重要組成部分,針對動物源性飼料成分鑒定需求,采用PCR橫向流動試紙條技術實現快速檢測。2019年10月25日發布,2020年5月1日正式實施。


    核心檢測原理

    技術環節 關鍵技術 參數要求
    DNA提取 CTAB法 純度A260/A280=1.7-1.9
    PCR擴增 特異性引物 退火溫度55℃
    試紙條檢測 FITC/生物素雙標記 檢測限0.1%

    關鍵操作要點

    DNA提取流程

    采用CTAB裂解緩沖液(20g/L CTAB+1.4mol/L NaCl)在65℃水浴1小時,經氯仿/異戊醇抽提后,用70%乙醇沉淀DNA。特別注意樣本量需≥100mg以保證提取效率。

    PCR體系配置

    標準反應體系包含:
    - 2μL 10×PCR緩沖液(含20mM Mg2+)
    - 0.8μL上下游引物(5μmol/L)
    - 0.2μL ExTaq酶(5U/μL)
    - 1μL DNA模板(4ng/μL)


    結果判定標準

    需同時滿足以下條件:
    1. 陽性對照:質控線和檢測線均顯色
    2. 陰性對照:僅質控線顯色
    3. 樣本檢測:兩條線顯色判定為陽性,與NCBI數據庫比對相似度需≥97%


    技術優勢對比

    與傳統ELISA方法相比,本標準的PCR-橫向流動試紙條技術具有:
    - 檢測時間縮短至3小時(原需8小時)
    - 靈敏度提高10倍(0.1% vs 1%)
    - 可同時檢測FITC和生物素雙標記產物

     

    請注意,本內容不等同于標準原文,內容僅供參考,本站不保證內容的正確性。準確、完整的信息請參閱正式版文本。

     

     

    SN/T 5145.2-2019

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    標準號
    SN/T 5145.2-2019
    別名
    SNT5145.2-2019
    SN5145.2-2019
    發布
    2019年
    總頁數
    9頁
    發布單位
    行業標準-商品檢驗
    當前最新
    SN/T 5145.2-2019
     
     
    引用標準
    GB/T 1.1-2009 GB/T 14699.1 GB/T 27403-2008 GB/T 6682

    本標準規定了動物源性食品中馬爾他勒菌的檢測方法。

    術語 
    PCR檢測 PCR Detection
    馬爾他勒菌 Marettimicrobacterium
    DNA提取 DNA Extraction
    引物 Primer
    標準曲線 Standard Curve

    SN/T 5145.2-2019 中提到的儀器設備

    PCR儀

    ExTaq Hot Start
    用于執行PCR擴增的儀器。
    分光光度計

    未指定
    用于測量DNA濃度和純度的設備。

    專題


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