二、注意事項 1、在分離外周血單個核細胞過程中,將稀釋血液加于分層液上時,要避免沖散分層液面,而要使之形成良好的界面,否則影響分離結果。 2、此法操作得當,單個核細胞得率可達80%-90%,影響得率最重要的因素是分層液的比重。...
免疫細胞的分離: (1)外周血單個核細胞的分離 外周血中單個核細胞(淋巴細胞和單核細胞)的比重與紅細胞、多核白細胞及血小板不同,介于1.075-1.090之間,因而可利用一種比重介于1.075-1.092之間而近于等滲的溶液作密度梯度離心,使一定比重的細胞按相應密度梯度分布而加以分離。常用的分層液有Ficoll與Percoll兩種。 ...
外周血單個核細胞即外周血中具有單個核的細胞,包括淋巴細胞和單核細胞。體外檢測淋巴細胞首先要分離外周血單個核細胞,目前主要的分離方法是Ficoll-hypaque(葡聚糖-泛影葡胺)密度梯度離心法,因為血液中各有形成分的比重存在差異最多12天,但需要刺激。 PBMC(外周血單個核細胞)是原代細胞,單純在體外培養是養不活PBMC的,最多活幾天,細胞肯定是慢慢死掉的。...
1、材料與方法1.1 外周血造血干細胞 APBSC采集自經環磷酰胺(CTX)+重組?人粒細胞集落刺激因子(rhG-CSF)動員后的實體瘤患者(淋巴瘤、乳腺癌),采集使用CS3000- Plus血細胞分離機(Baxter公司,美國)。1.2 CD34+細胞的標記 對10份APBS?C分別進行2種不同再處理與CD34標記。 ...
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