1.選擇高質量的微柵網(直徑3mm),這是關系到能否拍攝出高質量高分辨電鏡照片的第一步;(注:高質量的微柵網本實驗室還不能制備,是外購的,價格20元/只;普通碳膜銅網免費提供使用。) 2.用鑷子小心取出微柵網,將膜面朝上(在燈光下觀察顯示有光澤的面,即膜面),輕輕平放在白色濾紙上; 3...
化學方法制備樣品的程序通常是:清洗→化學固定→干燥→噴鍍金屬。 為了觀察臟器或細胞內部結構,可切斷冷凍樣品,再經化學固定、導電染色、脫水和臨界點干燥及噴鍍金屬,用掃描電鏡觀察割斷表面暴露出的內部結構。冷凍割斷又包括乙醇割斷法、二甲基亞砜割斷法及冷凍斷裂法等多種。用冷凍割斷法可獲得高分辨的組織細胞內部...
酶細胞化學的一個重要問題是既要保存好細胞內酶的活性,又要保存好細胞的結構,因此選擇適當的固定劑種類、濃度、固定的方式和時間是細胞化學技術的一個關鍵問題。光鏡樣品固定多選用中性福爾馬林或多聚甲醛,4℃、24小時,常規的石蠟包埋切片可以滿足相當一部分酶的細胞化學要求;電鏡樣品固定通常用0.5~2%戊二醛...
雙向凝膠電泳的原理是第一向基于蛋白質的等電點不同用等電聚焦分離,第二向則按分子量的不同用SDS-PAGE分離,把復雜蛋白混合物中的蛋白質在二維平面上分開。近年來經過多方面改進已成為研究蛋白質組的最有使用價值的核心方法。 雙向電泳成功的關鍵在于建立一套有效的、可重復的樣品制備方法。樣品制備的影響...
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