結締組織染色實驗——網狀纖維與膠原纖維染色
| 實驗方法原理 | 網狀纖維是網狀結締組織中的一種纖維，由交錯排列的纖細的纖維組成。由于網狀纖維由含有糖蛋白的膠原蛋白組成，這種組織蛋白質易與氨性銀結合，再選用酸性染料染色液，能夠顯示網狀纖維與膠原纖維的二種組織結構成分。常用 Gomori 銀與麗春紅-苦味酸復合染色法。 |
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| 實驗材料 | |
| 試劑、試劑盒 | |
| 實驗步驟 | 氨性銀溶液 甲液：硝酸銀 10.2 g，蒸餾水 100 ml。 乙液：氫氧化鈉 3.1 g，蒸餾水 100 ml。 取甲液 5 ml，滴加氨水至溶解清亮為止。再加入 5 ml 乙液，此時溶液突然變為黑色，再滴加氨水至清亮為止。補加 4 滴氨水，用蒸餾水補足 50 ml。 高錳酸鉀氧化液：高錳酸鉀 0.5 g，蒸餾水 95 ml，3％ 硫酸 5 ml。 草酸漂白液：草酸 2 g，蒸餾水 98 ml。 硫酸鐵銨液：硫酸鐵銨 2 g，蒸餾水 98 ml。 1. 石蠟組織切片，常規脫蠟至水。 2. 高錳酸鉀氧化液處理 5 min，自來水洗 1 min。 3. 草酸漂白液浸泡 2 min，自來水 1 min。 4. 硫酸鐵銨液處理 2 min，自來水洗 2 次。 5. 蒸餾水洗 2 次，氨性銀溶液處理 1 min。 6. 蒸餾水洗 2 次，20％ 甲醛液還原 3 min。 7. 蒸餾水洗 2 次，0.2％ 氯化金處理 1 min。 8. 蒸餾水洗 2 次，麗春紅-苦味酸染色液處理 3 min。 9. 無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。 展開? |
| 注意事項 | 1. 配制氨性銀溶液必須使用干凈器皿，放在冰箱內保存，可用較長時間。 2. 高錳酸鉀氧化液存放時間不能過長，以免失去氧化效果。 3. 氨性銀染色后，不能將銀液傾去，要將蒸餾水直接倒在組織切片上輕洗。 |
| 其他 | 結果：網狀纖維呈黑色，膠原纖維呈紅色，背景呈黃色。 |
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