血液檢查中的BCA是什么意思
原理簡介
BCA(bicinchoninic acid)法蛋白濃度定量試劑盒是在世界上常用的蛋白濃度檢測方法之一BCA法基礎上改進而成。眾所周知,二價銅離子在堿性的條件下,可以被蛋白質還原成一價銅離子(biuret reaction),一價銅離子和獨特的BCA Solution A(含有BCA)相互作用產生敏感的顏色反應。兩分子的BCA螯合一個銅離子,形成紫色的反應復合物。該水溶性的復合物在562nm處顯示強烈的吸光性,吸光度和蛋白濃度在廣泛范圍內有良好的線性關系,因此根據吸光值可以推算出蛋白濃度。
產品特點
1.步驟簡單,45分鐘內完成測定,比經典的Lowry法快4倍而且更加方便。
2.靈敏度高,檢測濃度下限達到25μg/ml,最小檢測蛋白量達到0.5μg,待測樣品體積為1-20μl 。
3.BCA法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的去污劑等化學物質的影響,可以兼容樣品中高達5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20, 60, 80。
4.在20-2000μg/ml濃度范圍內有良好的線性關系。
5. 檢測不同蛋白質分子的變異系數遠小于考馬斯亮藍法蛋白定量。
BCA蛋白質定量檢測試劑
在蛋白質的表達純化,結構和功能的研究工作中,蛋白質的定量隨處可見。但是,什么是理想的蛋白質定量方法?如何準確、快速的對蛋白質進行定量,對于不同的樣本,如何選取相應的蛋白質定量試劑和方案?如何避免實驗中引入的其它物質對蛋白質定量的干擾,PIERCE為這一切提供了可以信賴的解決方案。
PIERCE的BCA(bicinchoninic acid)蛋白質檢測試劑是當前比Lowry法更優越的專用于檢測總蛋白質含量的產品。該方法以快速靈敏、穩定可靠且對不同種類蛋白質變異系數甚小而深受專業人士的青睞。其中MicroBCA產品可檢測到0.5μg/ml的微量蛋白,是目前已知的最靈敏的蛋白質檢測試劑之一。
主要特點:
· 準確靈敏:BCA試劑的蛋白質測定范圍是20-2000μg/ml,采用加強方法可檢測到
5μg/ml;MicroBCA試劑測定范圍是0.5-20μg/ml。
· 快速:45分鐘內完成測定,比經典的Lowry法快4倍而且更加方便。
· 經濟實用:除試管外,測定可在微孔板中進行,大大節約樣品和試劑用量。
· 不受樣品中離子型和非離子型去污劑影響。
· 檢測不同蛋白質分子的變異系數遠小于考瑪斯亮藍。
基本原理:
堿性條件下,蛋白將Cu++還原為Cu+, Cu+與BCA試劑形成紫顏色的絡合物,測定其在562nm處的吸收值,并與標準曲線對比,即可計算待測蛋白的濃度。