真菌毒素檢測方法
真菌毒素是由真菌在食品或飼料里生長產生的代謝產物,對人類和動物都有害。真菌和真菌毒素的廣泛存在,嚴重影響農作物的產量,降低農產品和飼料品質,造成巨大經濟損失。據悉,全世界每年由于霉變污染真菌毒素引起的農產品和工業原料的損失達數百億美元。我國谷物霉變主要發生在北緯31°線即長江以南地區,每年使糧食減產3~7%。真菌毒素一般都是相對分子質量小的物質, 通常不被糧食谷物加工工藝或食品的烹調加熱所破壞;所以在某種程度上比其他毒素如細菌毒素更危險。
糧食及飼料中真菌毒素的檢測方法可以分為三類:
一、 生物學檢測法:利用真菌毒素能影響微生物、水生動物、家禽等生物的細胞代謝來鑒定真菌毒素的存在,其方法專一性差,靈敏度低,已經很少使用。
二、 理化檢測法:通常是薄層色譜法(TLC)和高效液相色譜法(HPLC)。TLC雖然簡便,但靈敏度差;HPLC雖然靈敏度高,但樣品處理煩瑣,操作復雜,儀器昂貴,標準品耗用大。
三、 免疫化學檢測法:通過免疫學建立起來的分析技術,如ELISA方法和膠體金免疫層析方法。ELISA法特別適宜大批樣品集中檢測,膠體金免疫層析方法適合現場單個或少數樣品即時檢測。
ELISA法和膠體金法基于抗原抗體的免疫原理,在真菌毒素的現場檢測時具有以下優勢:
1) 單個樣品即可檢測,檢測成本低,適用范圍廣;
2) 靈敏度高:膠體金法可檢出量可達ng級。ELISA法檢出量可達pg級,并可定量測定。
3) 特異性強:抗體抗原的免疫反應特異性很強,結構類似物、熒光物質、有色物質對檢測的干擾很小,可檢測樣本本身顏色深的產品,如玉米。
4) 操作簡便,反應迅速:由于特異性強,簡化了樣品的預處理和提取純化過程,同時操作步驟也非常簡便,膠體金法5~10分鐘即可判讀結果,酶聯法1小時內出結果。
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技術原理
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