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    WesternBlot有很多雜帶原因分析

    2020.4.23

    1)目的蛋白有多個修飾位點,本身可以呈現多條帶,建議查閱文獻或進行生物信息學分析,獲得蛋白序列的修飾位點信息,通過去修飾確定蛋白實際大小

    2) 樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑;樣本處理時在冰上操作

    3)雜蛋白多,建議處理目的蛋白

    4)抗體特異性不強,建議使用特異性強的抗體

    5)抗體孵育時間過久,建議減少抗體孵育時間

    6)二抗與抗原有交叉反應,建議選擇合適的封閉物

    7)二聚體或多聚體存在,建議增加蛋白質變性過程及強度

    8)底物顯色與曝光時間過長,建議縮短顯色及曝光的時間

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