RPA重組酶是什么？
2006 年，Piepenburg 等首次提出了重組酶聚合酶擴增反應(recombinase polymerase amplification,RPA)。它是由重組酶(T4 uvsX)、聚合酶(Bsu)和單鏈結合蛋白(gp32)以及兩條特異性的上下游引物參與的等溫擴增。
首先， T4 uvsX 在輔助因子 uvsY 的作用下與引物結合形成核酸蛋白復合物，然后該復合物尋找與靶標 DNA 的互補區域進行雜交并置換下另一條單鏈，置換下的單鏈馬上被 gp32 結合防止其再與互補鏈雜交，最后 T4 uvsX 在 ATP 的作用下與引物解離，聚合酶 Bsu 與引物結合并沿模板進行延伸(圖 1)。
該反應在 37~42℃下 30 min 內可以獲得 1012 拷貝的擴增產物，其靈敏度可達到單拷貝，其擴增產物長度在 500 bp 以內最佳。對 RPA 產物的 檢測可采用包括瓊脂糖凝膠電泳、熒光探針實時檢測、及側流層析檢測等多種方法。由于 RPA反應快速、靈敏以及恒溫條件溫和等特點，因此易于與微流控芯片結合開發出對病原微生物的即時檢測(point-of-care testing, POCT)技術 。
圖 1 重組酶聚合酶擴增反應基本原理；1：在重組酶作用下，引物與靶序列結合；2：引物與靶序列結合后置換下的單鏈被單鏈結合蛋白結合；3：在聚合酶作用下進行延伸， 同時置換下的單鏈被單鏈結合蛋白結合；4：同源雙鏈分離，持續延伸；5：形成新的雙鏈，并進行下一個循環。
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