快速核酸檢測黑科技——RPA
面對突如其來的新冠疫情
核酸檢測引來發展新高潮
尤其在分子診斷領域
傳統核酸分子檢測技術
不斷蛻變和創新
從未淡出我們的視野
經歷了經典PCR、實時定量PCR
再到現在的數字PCR
三個階段
這些都離不開PCR的高溫變性
低溫退火和延伸
離不開精準控溫的PCR儀
今天小編給你介紹一個黑科技
可以替代PCR的核酸檢測技術
--重組酶聚合酶等溫擴增技術(RPA)
RPA(Recombinase Polymerase Amplification)全稱重組酶聚合酶等溫擴增技術,被稱為可以替代PCR的核酸檢測技術。
RPA技術主要依賴于三種酶:能結合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性,最好反應溫度在37°C左右。
RPA原理
重組酶與引物結合形成的蛋白-DNA復合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會發生鏈交換反應形成并啟動DNA合成,對模板上的目標區域進行指數式擴增。被替換的DNA鏈與SSB結合,防止進一步替換。在這個體系中,由兩個相對的引物起始一個合成事件。整個過程進行得非常快,一般可在十分鐘之內獲得可檢出水平的擴增產物。
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