吉凱基因Dr.L的私家實驗筆記——穩定株
1、什么是瞬時表達和穩定表達？
課前熱身，了解的同學請直接進入題2
瞬時表達：外源片段不能隨細胞分裂而一同復制，導致表達時間短暫，且表達量隨時間逐漸下降。
穩定表達：是指外源片段整合入細胞基因組中，并能隨細胞分裂穩定傳遞下去，表達量長時間處于穩定水平。
那穩定株，顧名思義當然是屬于穩定表達的體系了。
2、我的實驗是否需要篩選穩定株？
能夠達到穩定表達的方法不止穩定株一種哦。我們使用慢病毒感染細胞，也一樣可以達到穩定表達的效果。什么原理呢？
*慢病毒是整合型的逆轉錄病毒載體，感染細胞后，攜帶的外源片段會直接整合入細胞的基因組DNA中，并能夠隨細胞分裂穩定傳代。所以對于大多數實驗，包括細胞周期、凋亡、增殖等功能學實驗，甚至裸鼠成瘤等長時間的實驗，只要細胞感染效率較高（70%～80%以上），感染一次慢病毒就可以達到長時間、高效的基因操作的目的，滿足實驗要求，無須篩選穩定細胞株。
3、細胞感染效率較高（70%～80%以上），臣妾做不到啊，難感染的細胞怎么辦？
少年，恭喜你選擇了hard模式。那就趕緊召喚穩定株吧。那么問題來了，選擇何種方式將外源片段整合入細胞基因組中呢？
質粒（常規轉染/電轉）：這種方法介導的整合幾率和中500w彩票差不多哦
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