不同因素對細胞融合率的影響實驗的目的意義
細胞融合的影響因素
一、影響動物細胞融合的因素
在動物細胞的融合過程中,細胞融合率不僅會受到促融劑的影響,而且離子強度、離子種類、溫度、PH、細胞性質等均會對細胞融合率產生影響。
1、細胞融合時,溫度和運動狀態需要適宜。
2、細胞融合過程中,一般會消耗大量的氧氣,缺氧時不融合。
3、某些細胞融合時需要Ca2+,不然不融合。
4、PH為7.4-7.8為Z合適的酸堿度,不在該范圍內,不適合融合。
5、親本細胞表面性質對細胞融合率有比較大的影響,如果表面光滑,那么融合比較難,如果表面覆蓋絨毛而不規則,那么融合比較容易。
6、不同的細胞種類,融合效果也會有所差異。例如淋巴細胞、血細胞幾乎不融合,腹水癌融合比較容易。
二、影響植物細胞融合的因素
植物原生質體融合不存在種屬特異性,和其自身種屬不相關聯,因此,只有外界條件影響融合效率。
1、將少量CaCI2加入到融合液中,會對電導率起到一定的維持作用,從而保護細胞。除此之外融合率會受到電脈沖大小、處理時間長短、以及交變電流的強弱的影響。
2、在融合前,將原生質用混合鹽溶液進行處理,和將伴刀豆蛋白、二甲基亞砜等添加進促融劑中,能夠使得融合率提高。
3、當電場誘導融合時,原生質體密度會對融合率產生影響。2-8×104個/ml為Z適宜的密度,如果密度大于106個/ml,那么會融合成團;如果密度小于104個/ml,那么會得到較低的融合效率。
4、作用時間在PEG誘導融合中起到關鍵性作用,特別重要的是高Ca2+和PH溶液處理時間長短。如果時間過短,那么不融合;如果時間過長,那么會嚴重損傷原生質體,大大降低融合效率。
5、融合效率也會受到PEG規格和純度的影響。