色譜柱長對測定結果的影響有哪些
現在色譜柱的柱效比以前的高很多了,用短柱就能滿足分離度的要求,就沒必要用長柱,短柱快速啊,省溶劑又省時間。
不是柱越長越好,這需要流動相的線速度和柱子的長度以達到平衡才行,如果僅是柱子增長,到一定程度所造成的峰擴展將嚴重影響靈敏度和柱效(溶劑不變的情況下),這反而造成不好的影響。而一般情況下,隨柱子長度增加,用于分離的流動相消耗增加,同樣,在一定的范圍內這個消耗與理論板數的增加呈良性效應,但如果無意義的加長,則只會增加溶劑的消耗,而對分離的正效應減小。而柱子的內徑越粗,造成的樣品分散程度越差(即樣品無法在到達柱頭時呈現面狀分布),這樣峰的對稱性下降,分散性增大,溶劑消耗也增大,而可能理論板數反而下降!所以,相關的柱子都是有一定要求的。否則,以UPLC的耐壓性,完全可以使用更長的柱子,而不需要粒徑微化也可達到相關的要求,這樣方法的普及性及柱的成本完成可以做的更低不是更好嗎?!
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