濃縮膠的配制方法
一般同工酶可選擇7?5%~10%的膠(過氧化物酶和酯酶7?5%較合適,超氧化物歧化酶用10%,可溶性蛋白可根據需要配制)。將配制好的凝膠液置真空干燥器中,抽氣10Min,再加入TEMED15μl;混勻后用一細玻棒引流,沿無凹槽的玻板緩緩注入膠室中,注膠過程要防止氣泡產生。膠液加到離凹槽3CM處為止,立即用注射器輕輕在膠溶液上面鋪1CM高的水層,但不要擾亂丙烯酰胺膠面。待分離膠和水層之間出現清晰的界面時,表示聚合已完成。用注射器小心吸出上層覆蓋水,按表5-1配制好濃縮膠,抽氣后加入5μlTEMED,混合后加到分離膠上層,插入預先選擇好的樣品梳,注意不要帶入氣泡。
推薦
-
焦點事件