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    綠螢光蛋白的發光原理

    2022.5.27

    我們知道,熒光的發光是被一定波長光激發后,電子被激發到高能級,隨后向低能級躍遷的過程中發出比激發光波長更長的熒光,這也就是上面提到的受激輻射。我們將能接受光輻射,并躍遷發出顏色光的基團叫做生色團。綠色熒光蛋白含有一個三肽的單位Ser(65)-Tyr(66)-Gly(67),在蛋白質折疊的時候,這三個氨基酸會折疊成5元環的咪唑酮的結構,也就是生色團。當它被激發后,失去一個質子,形成了帶負電荷的結構,在這種構象下就可以發光了。

    激光的原理之一——受激輻射。受激輻射指的是如下過:處于激發態的原子,在其發生自發輻射前,若受到某一外來光子的作用,而且外來光子的能量恰好滿足hv=E2-E1,原子就有可能從激發態E2,躍遷至低能態E1,同時放出一個與外來光子具有完全相同狀態的光子。 ? ?可是藍色和綠色顯然是兩種波長。至于熒光呢……是這樣:有些物質在收到光照后,在撤去外光源后在一定時間內仍然會持續發光。 ?物質所發熒光的波長總是大于激發光的波長(恰好就是藍光激發綠螢光哦)。分子被一次性激發到高能態后,再慢慢向下方能級逐漸躍遷、發光。它蛋白質序列里的Ser65–Tyr66–Gly67構成了無需催化的發光分子。使用時一般用光線激發,395nm和475nm是兩個最大激發波長,發射波長在509nm。不同的GFP發光的生色團不太一樣吧 最明顯的是它們的激發和發射光的波長都不同,不過原理都應該是上邊說的熒光。


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