為什么酶切后沒有條帶
什么酶呢?最后酶切組的電泳條帶是彌散,是只有質粒條帶沒有酶切產物條帶,還是干脆就是空白?
如果是彌散,最有可能的是所用的酶的反應條件要求比較嚴格,因為掌握不當而產生了星號活性,導致把質粒切碎了。建議查一下所用酶的酶切條件。
如果是有質粒條帶而沒有短片段條帶,也就是說沒切開了。可能酶切位點發生了突變,也可能是酶失活了。
如果是空白...我也不知道怎么回事兒了...再重復一次吧。
如果認為之前的步驟都沒什么問題,不如直接送測序。比酶切檢驗還要精確呢。
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什么酶呢?最后酶切組的電泳條帶是彌散,是只有質粒條帶沒有酶切產物條帶,還是干脆就是空白?
如果是彌散,最有可能的是所用的酶的反應條件要求比較嚴格,因為掌握不當而產生了星號活性,導致把質粒切碎了。建議查一下所用酶的酶切條件。
如果是有質粒條帶而沒有短片段條帶,也就是說沒切開了。可能酶切位點發生了突變,也可能是酶失活了。
如果是空白...我也不知道怎么回事兒了...再重復一次吧。
如果認為之前的步驟都沒什么問題,不如直接送測序。比酶切檢驗還要精確呢。