微生物限度檢查法的菌液制備
接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養物至營養肉湯培養基或營養瓊脂培養基中，培養18~24 小時；接種白色念珠菌的新鮮培養物至改良馬丁培養基或改良馬丁瓊脂培養基中，培養24~48 小時。上述培養物用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml 含菌數為50~100cfu 的菌懸液。接種黑曲霉的新鮮培養物至改良馬丁瓊脂斜面培養基中，培養5~7 天，加入3~5ml 含0.05%(v/v)聚山梨酯80 的0.9%無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。然后，用適宜方法吸出孢子懸液至無菌試管內，用含0.05%(v/v)聚山梨酯80 的0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml 含孢子數50~100cfu 的孢子懸液。菌懸液在室溫下放置應在2 小時內使用，若保存在2~8℃可在24 小時內使用。黑曲霉孢子懸液可保存在2~8℃，在驗證過的貯存期內使用。適用性檢查 取大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌各50~100cfu，分別注入無菌平皿中，立即傾注營養瓊脂培養基，每株試驗菌平行制備2 個平皿，混勻，凝固，置30~35℃培養48 小時，計數；取白色念珠菌、黑曲霉各50~100cfu，分別注入無菌平皿中，立即傾注玫瑰紅鈉瓊脂培養基，每株試驗菌平行制備2個平皿，混勻，凝固，置23~28℃培養72 小時，計數；取白色念珠菌50~100cfu，注入無菌平皿中，立即傾注酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養基，平行制備2 個平皿，混勻，凝固，置23~28℃培養72 小時，計數。同時，用相應的對照培養基替代被檢培養基進行上述試驗。
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