在收集到生物材料之后，最好能即刻進行RNA 制備工作。若需暫時儲存，則應以液氮將生物材料急速冷凍后，儲存于-80℃冷凍柜。在制備RNA 時，將儲存于冷凍柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破細胞，不可以先行解凍，以避免RNase 的作用。

1. 提取組織RNA 時，每50～100mg 組織用1ml Trizol 試劑對組織進行裂解；提取細胞RNA 時，先離心沉淀細胞，每5-10 ?106 個細胞加1ml Trizol 后，反復用槍吹打或劇烈振蕩以裂解細胞；

2. 將上述組織或細胞的Trizol 裂解液轉入EP 管中,在室溫15~30C下放置5 分鐘；

3. 在上述EP 管中，按照每1ml TRIZOL 加0.2ml 氯仿的量加入氯仿，蓋上EP管蓋子，在手中用力震蕩15 秒，在室溫下（15℃～30℃）放置2～3 分鐘后，12000g（2℃～8℃）離心15 分鐘；

4. 取上層水相置于新EP 管中,按照每1ml TRIZOL 加0.5ml 異丙醇的量加入異丙醇，在室溫下（15℃～30℃）放置10 分鐘,12000g（2℃～8℃）離心10 分鐘；

5. 棄上清， 按照每1ml TRIZOL 加1ml 75%乙醇進行洗滌， 渦旋混合，7500g（2℃～8℃）離心5 分鐘，棄上清；

6. 讓沉淀的RNA 在室溫下自然干燥；

7.用Rnase-free water 溶解RNA 沉淀。