網絡 ?

?

第三節　軟組織與骨腫瘤細胞化學

軟組織亦稱間葉組織，它的廣義包括結締組織、脂肪組織、肌肉、血管、滑膜、周圍神經以及骨組織等。本節　研究的對象為來源于這些組織的腫瘤，與一些與之相關但組織發生尚不太明了的腫瘤的免疫細胞化學標記。軟組織惡性腫瘤雖然只占人體全部惡性腫瘤的1%左右。但由于這類腫瘤形態很相似。在常規切片下確定其組織發生，常是臨床病理診斷中的難題之一，為病理工作者所關注。由于免疫細胞化學的發展，研制成許多標記抗體，提供了確定軟組織腫瘤的組織發生的和鑒別診斷應用的標記抗體。但是有的抗體特異性不夠，存在交叉反應以及腫瘤細胞的異質性、多向分化潛能等問題，致該項技術僅為臨床診斷解決了部分問題，尚有許多問題有待進一步解決。

一、常用標記抗體

用于軟組織腫瘤可在石蠟切片表達的抗體已有多種，請參見表12-1。

表12-1 軟組織細胞可用的標記抗體

抗原名稱 標記細胞 （1）角蛋白（Keratin） 上皮與肌上皮細胞 （2）波紋蛋（Vimentin） 間葉分化細胞、內皮細胞 （3）結蛋白（Desmin） 肌組織分化細胞 （4）肌動蛋白（Actin） 肌細胞，肌上皮細胞，肌纖維 （5）肌漿球蛋白（Myosin） 肌母細胞，部分內皮細胞及肌細胞 （6）層粘蛋白（Laminin） 平滑肌與雪旺氏細胞，基底膜 （7）纖維連接蛋白（Fibronectin） 間葉細胞，纖維―組織細胞及滑膜細胞，間皮細胞 （8）第VII因子（Factor VII rag） 血管內皮細胞 （9）肌球蛋白（Myoglobin） 骨骼肌細胞 （10）S―100蛋白（S―100protein） 周圍神經，朗格罕氏細胞，黑色素細胞、單核/巨噬細胞，淋巴結內的小結樹突細胞。 （11）髓鞘基質蛋白（Myelin basic protein） 周圍神經細胞 （12）a―1 抗胰蛋白酶（α―Antitrypsin） 組織細胞 （13）a―1 抗糜蛋白酶（α―1Antichymotrypsin 組織細胞 （14）溶菌酶（Lysizyme） 組織細胞、粒細胞、軟骨細胞 （15）酸性磷酸酶（Acid phosphatose） 骨與軟骨細胞 （16）堿性碗酸酶（Alkaline phosphatase） 骨與軟骨細胞

上述各種抗原抗體標記效果一般與其被標記細胞含抗原量呈正相關。一般良性瘤與正常細胞的反應相一致。而惡性腫瘤由于分化差，標記反應與分化程度呈平行關系，分化很低者則可呈弱或陰性反應。例如Lysozyme與myosin在惡性腫瘤可不表達。要注意中間絲抗體在各種間葉細胞之間有交叉反應。尤其是波紋蛋白抗體更為廣泛。賴日權等報告（1990年）發現128例上皮性腫瘤中有45例（35.1%）有波紋蛋白表達。因此告誡我們最好應用幾種同功效抗體一起標記，并結合組織學改變綜合分析，評價標記效果更為準確。

二、軟組織腫瘤免疫組織化學

（一）纖維組織與纖維組織細胞性腫瘤免疫細胞化學標記

纖維組織腫瘤缺少專一性抗體標記。特別分化較低的纖維肉瘤，一般應用Masson 或Van Gieson染色，再用肌源性抗體等排除法來確診，對雙向分化的惡性纖維組織細胞瘤，應采用纖維與組織細胞兩種標記抗體。即可應用Vimentin和抗胰蛋白酶或抗糜蛋白酶抗體標記取得滿意的結果，如果是多形性惡性纖維組織細胞瘤常與多形性脂肪肉瘤及多形性橫紋肌肉瘤相混，鑒別困難時，則應輔以肌球蛋白等抗體進行區別。

（二）肌源性腫瘤的免疫細胞化學標記

1．平滑肌腫瘤平滑肌腫瘤在HE染色組織學改變可與纖維性，神經纖維性及纖維組織細胞腫瘤相混淆。目前缺乏對平滑肌的專一性抗體，只有采用間接排除法。肌動蛋白，肌漿球蛋白及結蛋白對平滑肌腫瘤標記強陽性，而組織細胞陰性。加上肌球蛋白和S―100蛋白表達陰性則排除了纖維組織細胞瘤和神經源以及橫紋肌腫瘤。層粘蛋白可在平滑肌和雪旺氏細胞腫瘤陽性表達，可用此區別纖維性腫瘤。

2．骨骼肌腫瘤多形性橫紋肌肉瘤如果能找到有橫紋的帶狀肌母細胞，比較易于確診，但有時找不到帶狀肌母細胞，易與多形性惡性纖維組織細胞瘤混淆。小細胞性胚胎性橫紋肌肉瘤則與軟組織惡性淋巴瘤，尤文氏肉瘤，周圍性神經母細胞瘤難于鑒別。應用比較特異的肌球蛋白抗體就可識別。肌漿球蛋白和結蛋白抗體亦可作陽性標記，因為平滑肌腫瘤不可能是小細胞性，另外加用白細胞共同抗原（LCA）和S―100抗體則能排除淋巴瘤和神經母細胞瘤。在實際工作中要引起我們注意的是有時一些小細胞肉瘤浸潤人橫紋肌組織，在瘤細胞中混雜一些萎縮狀橫紋肌細胞，出現肌球蛋白抗體陽性，而不是橫紋肌肉瘤。另外子宮內膜混合性Mulleriam肉瘤，Wilm’s瘤及惡性蠑螈瘤中出現橫紋肌源瘤細胞，肌球蛋白抗體標記陽性，這對預后估計有幫助。Eusebi強調侵入骨骼肌的惡性上皮性細胞也可呈現肌球蛋白陽性表達，應特別注意。

（三）血管源腫瘤免疫細胞化學標記

1．血管內皮瘤與肉瘤第Ⅷ因子抗體對血管內皮細胞是很有用的標記物，尤其是良性血管瘤或血管內皮瘤。而在血管內皮肉瘤，腫瘤性內皮細胞分化低者可為弱陽性或陰性。最近有文獻報道，波紋蛋白對內皮細胞也有良好的標記作用。陽性內皮細胞位于網狀纖維包圍之中也是血管肉瘤的一個形態學特點。

2．血管周邊細胞腫瘤血管周邊細胞是包被在血管基底膜之外，是一種多能干細胞。它可能產生的腫瘤有血管周邊瘤或肉瘤，血管球瘤及Kaposi’s肉瘤。分述如下：

（1）血管周邊細胞瘤或肉瘤：瘤細胞包繞在裂隙狀血管之外周，周邊細胞第Ⅷ因子陰性而瘤細胞之間富于纖維連接蛋白。但這些抗體是非特異性的，最好用多種抗體來排除其他腫瘤的可能性。

（2）血管球瘤：目前認為其增生的瘤細胞也可能來自血管周邊細胞，在瘤細胞內外均顯豐富的肌動蛋白和肌漿球蛋白。診斷時要注意發生部位及組織學特點。

（3）Kaposi’s肉瘤：至今該瘤的組織發生尚有爭論。多數認為是血管內皮細胞發生，但其臨床表現與發展過程有別于血管肉瘤。其由惡性短梭形細胞組成，間以許多間隙，內有紅細胞，新近Guarda等報道梭形細胞第Ⅷ因子陽性，但也有陰性。有的作者認為該腫瘤來源于淋巴管內皮的可能性大于血管內皮。Barsky指出，應用抗基底膜抗體可以區別血管與淋巴管，后者缺乏。

（四）雙向分化的軟組織腫瘤免疫細胞化學標記

這里的雙向分化是指有纖維性與上皮性兩種瘤細胞為主構成的腫瘤。電鏡觀察證明腫瘤細胞包括未分化間葉細胞，上皮性細胞以及介于兩者之間的中間細胞，這里討論的雙向分化腫瘤包括滑膜肉瘤，間皮肉瘤、上皮樣肉瘤腦膜瘤或肉瘤的免疫細胞化學標記，現分述如下：

1．滑膜肉瘤滑膜肉瘤是由纖維型與上皮型兩種細胞組成的雙向分化腫瘤。分化高者上皮細胞呈腺樣或裂隙排列，與纖維型瘤細胞分界清楚。而分化低者兩型瘤細胞混染組成，分界不清。也有以某一成分占優勢的單相滑膜肉瘤。應用纖維連接蛋白纖維型瘤細胞漿內陽性。有別于其他肉瘤細胞在細胞外陽性。波紋蛋白亦可陽性。上皮型成分細胞角蛋白陽性。組織細胞標記抗體陰性。纖維細胞型單相滑膜肉瘤應與纖維肉瘤及纖維母細胞性惡性纖維組織細胞鑒別，可用纖維連接蛋白來區別。另外再加用組織細胞與上皮性標記來輔助區別。

2．上皮樣肉瘤該腫瘤的組織發生尚未完全肯定。但認為與滑膜肉瘤有相關性。在電鏡上得到支持。它亦有纖維型和趨上皮分化傾向。瘤細胞呈結節　狀排列，中央易見到壞死。免疫組化顯示細胞內纖維連接蛋白、肌動蛋白及波紋蛋白陽性表達。

3．間皮瘤或肉瘤按WHO分類分為上皮型，纖維型及混合型。一般波紋蛋白對梭形細胞及部分上皮型細胞陽性表達。而細胞角蛋白對上皮型及部分梭形細胞陽性。

4．腦膜瘤與肉瘤良性腦膜瘤一般易于診斷，但惡性（間變型）腦膜瘤常規切片確診比較困難、組織學類型有纖維肉瘤樣型，血管肉瘤樣型，巨細胞肉瘤樣型等。電鏡證實由未分化原始間葉細胞、中間型細胞、梭形細胞、巨細胞、上皮樣細胞組成，具有雙向分化的特點。潘傳敬等對18例間變型腦膜瘤做多種抗體標記顯示：一般良性腦膜瘤不同型瘤細胞對波紋蛋白、EMA、角蛋白及S―100蛋白均呈陽性反應。而在惡性腦膜瘤則未分化細胞全陰性。而中間型細胞則除S―100以外其余抗體可均陽性。梭形細胞波紋蛋白與S―100陽性。巨細胞與上皮細胞與中間型細胞反應相同。

（五）脂肪源腫瘤免疫細胞化學標記

脂肪肉瘤由脂母細胞和前母細胞組成，有高分化型，粘液型，圓細胞及多形細胞型，后兩型與未分化肉瘤與多形性橫紋肌肉瘤，惡性纖維組織細胞瘤很難區別。如果僅憑有無脂母細胞來確診是不行的。因為“惡性纖維組織細胞”亦有脂肪染色陽性細胞。但脂肪肉瘤缺乏特異性免疫組化標記抗體。S―100蛋白對成熟脂細胞陽性，但脂肪肉瘤陰性。目前只有采用系列性抗體來排除多形性橫紋肉瘤與惡性纖維組織細胞而確診。

（六）外周神經腫瘤免疫細胞化學標記

惡性神經鞘瘤常與纖維肉瘤、低分化滑膜肉瘤相混淆。但應用S―100、NSE、

? ?

?