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  • 實驗方法> DNA實驗技術> DNA基礎知識>常用的幾種分子標記

    常用的幾種分子標記

    關鍵詞: 分子標記來源: 互聯網

    RAPD利用 10 個堿基的一個或幾個隨機引物非定點地擴增 DNA 片段,一般一個引物可擴增 6-12 條 DNA 片段,利用凝膠電泳分開擴增的片段,從而進行基因多態性研究。 RAPD 是一種能快速進行基因多態性研究的技術,并且由于不涉及印跡雜交、放射性自顯影等技術,因此簡便易行。 SSR 真核生物的基因組中散布著大量的串聯重復序列,其中, 2-4 個 bp 的微衛星序列 (Microsatellite 或叫簡單序列重復 SSR:Simple Sequence Repeats) 具有高度多態性。 微衛星在結構上的最大特點是兩端序列較保守, SSR 引物根據與微衛星重復序兩端的特定短序列設計,用來擴增重復序列本身,從而揭示微衛星的多態性。 SSR 是檢測多態性的一種有效方法。 微衛星( SSR )是廣泛分布于真核生物基因組中的短串聯重復序列( 1 - 7bp ), SSR 實驗一般檢測到的是一個單一的多等位基因位點;是共顯性遺傳,可鑒別雜合子和純合子;結果重復性很高。通常使用聚丙烯酰胺凝膠電泳,分辨率高,可檢測出單拷貝差異。 SSR 廣泛應用于生物遺傳作圖、群體遺傳研究、個體間親緣關系鑒定等方面。 建立于DNA基礎之上的分子標記對于作物改良具有重要作用。 AFLP(Amplified fragment length polymorphism,簡稱AFLP)國內譯為擴增片段長度多態性,是一種DNA分子標記技術。利用這一方法,在不需要預先知道DNA序列信息的情況下就可以同時進行多數DNA酶切片的PCR擴增。目前,該技術不僅在小麥、玉米、棉花和大豆等主要農作物上得以應用,而且在蔬菜(番茄、馬鈴薯、鷹嘴豆等)以及植物基因組研究的模式植物擬南芥上廣泛應用。討論了AFLP在主要作物的品種鑒定、遺傳多樣性分析、遺傳作圖、基因定位以及輔助選擇等方面的應用進展。 RFLP、RAPD、AFLP、SSR等已經廣泛應用于DNA指紋分析、種質資源遺傳多樣性分析、基因定位、遺傳作圖、分子標記選擇育種等。用于作物育種的分子標記技術主要有RFLP、RAPD、SSR、 AFLP、STS等。它們主要用于構建分子標記遺傳圖譜、分子標記篩選育種親本、鑒定品種、標記目的性狀基因等方面 。

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