免疫金銀染色(IGSS)操作流程
關鍵詞: 免疫金銀染色 IGSS 操作流程來源: 互聯網
(一)石蠟切片IGSS
(1)切片脫蠟至水。
(2)0.1%胰蛋白酶37℃消化20min或抗原修復20min(98℃),自然冷卻至室溫。
(3)0.05mol/L(pH7.4)TBS洗3×3min.
(4)l%EA(卵蛋白)15min,不洗。
(5)適當稀釋的特異抗體室溫4h或4℃孵育20h,或37℃孵育1h.
(6)0.05m01/L(pH7.4)TBS洗3×5min.
(7)0.02m01/L(pH7.4)TBS(內含0.1%BSA)洗10min.
(8)1%EA 15min,不洗,1:10~1:20稀釋的PAGlonm室溫孵育1h,或37℃孵育30min.
(9)0.05mol/L(pH7.4)TBS洗10min.
(10)1%戊二醛洗10min.
(11)雙蒸水洗5min.
(12)1%明膠洗5min.
(13)銀避光顯影8~15min.
(14)雙蒸水洗15min.
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