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1. 用 PDQuest軟件 或肉眼比對，找出感興趣的蛋白點，并做好標記和記錄。

2. 用 MilliQ水沖洗膠 2 次。

3. 用色譜純甲醇和 MilliQ水沖洗 Ep 管

4. 將槍頭(200μl)下端剪去，使其內徑略小于蛋白斑點的直徑，用色譜純甲醇和MilliQ水沖洗槍頭。

5. 對準斑點中央小心將蛋白切割下來，放入Ep 管，MilliQ水漂洗 2 次，如膠塊 太大，將其切成 1 x 1 mm 的膠片。

6. 將切好的點做好標記和記錄，置- 80℃ 保存或凍干后- 20℃ 存放。

注意事項：

1. 盡量避免皮膚和頭發的角蛋白的污染，在操作過程中應戴一次性的 PE 手套 (不用乳膠手套)和帽子。

2. 不要將膠長期存放于乙酸溶液中。

3. Ep 管及染膠的容器必須用甲醇和水充分清洗，尤其應與進行western blot ting 的容器分開，以避免 casein 或 BSA 的污染。