問：小試的時候用預裝柱摸索好的純化方法：

緩沖液（1）：上樣平衡緩沖液，PBS+0.8M 硫酸銨

緩沖液（2）：清洗雜蛋白緩沖液，PBS+0.3M 硫酸銨

緩沖液（3）：Tris-HCl pH9.0 0.1M

phenyl FF（high sub）疏水柱，收率與蛋白質性質都可以達到要求。在放大時候，就發現用Tris-HCl pH9.0 0.1M洗脫不下來我的目的蛋白，然后我改成用水洗脫，可以洗脫下我的蛋白，但是由于發酵產品產量的增加，現在洗脫峰中出現了酯類，就是蛋白與酯類在同一峰中出現.

雖然可以在不同的收集管中（目的蛋白現出來，然后緊接著就是有濁度的酯類），但是我的目的蛋白還是有微微的濁度，40度加速過夜，就能看見很明顯的濁度，我用搞濃度的TritonX-100可以將其溶解.

但是我的產品不能有很高濃度的TritonX-100，原來我設想用低濃度的TritonX-100作為洗脫液中的添加劑，想使目的蛋白和酯類分開，但是忘記了TritonX-100在280有吸收，所以不可取。

現在我想使酯類與疏水性強蛋白分開，還是要使用我現在填料，大家有什么好的建議嗎？

答：渾濁部分檢測肯定是脂類嗎？我覺得在水中蛋白溶解不好，特別是高濃度的容易出現乳濁狀的，如果確實是脂類，可以把條件改為100-20mM硫酸銨，這樣應該有個濃度能把蛋白和脂類分開，如果你小試沒問題的話。