Folin-酚測蛋白酶活問題解析
關鍵詞: 蛋白酶來源: 互聯網
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問:我想用該法測一種蛋白酶對混合蛋白底物(其實是昆蟲體壁蛋白)的酶活。請問:像我這種情況,還有必要做酪氨酸標準曲線嗎,用得找嗎?結果的酶活力應該怎么表示?是相當于對照吸光值增加的百分比嗎?對照的設計,除傳統的先加TCA后加底物外,我是否可以先用沸水浴滅活處理酶,然后按正常的順序做底物,再做TCA?
答:這個與Folin-酚有什么關系?
1、你的底物不是酪蛋白。
2、沸水浴滅活處理酶,這樣的對照肯定是不嚴格得,還要用光是TCA和緩沖液的做參比測定吸光度,當然一個先加TCA后加底物。另一個先加底物后加TCA了。
3、應該測對照液的吸光度值,但是對照液用什么是個問題。
所以可以用相當于對照(先加TCA后加底物)吸光值增加的百分比來表示。
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