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  • 實驗方法> 生物化學技術> 化學生物學實驗技術>噬粒

    噬粒

    關鍵詞: 噬粒來源: 互聯網

    噬粒 (phagemid 或 phasmid) 是由質粒載體和單鏈噬菌體載體構建成的。它們既有質粒的復制起點,又有噬菌體的復制起點。因此,在大腸桿菌細胞里,可以按正常的雙鏈質粒分子進行復制,生成雙鏈 DNA ;當存在輔助噬菌體的條件時,在噬菌體基因Ⅱ蛋白質的作用下,又可像單鏈噬菌體 M13 一樣按滾環模型復制出單鏈 DNA ,并在包裝成噬菌體顆粒后釋放出宿主細胞。最為常用的噬粒載體有 pUC118 和 pUCll9 。兩者除了多克隆位點的序列正好相反外,其余的序列都是相同的,它們可在宿主細菌內像質粒一樣地復制。當宿主細胞受到輔助噬菌體感染后,噬菌體載體便按單鏈噬菌體的方式進行復制,然后由輔助噬菌體提供的外殼蛋白包裝成噬菌體顆粒。輔助噬菌體是一類自身 DNA 復制效率極低的突變型,但可為宿主細胞的質粒 DNA 提供的復制和包裝所需的蛋白酶和外殼蛋白。

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