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  • 實驗方法> 蛋白質技術> 蛋白分離純化>凝膠柱的清洗問題

    凝膠柱的清洗問題

    關鍵詞: 凝膠柱 清洗來源: 互聯網

    問:最近在回收凝膠柱時(用的是鎳柱),經過多次的洗脫液繼續平衡清洗,發現還有一些很難去除的雜蛋白,不知應該用什么方法把這些難除的雜蛋白去除?

    答:一般用6M鹽酸胍+0.2M AC和2%的SDS清洗

    一般的柱子都是相同過程,大致順序如下

    1.6M鹽酸胍+0.2M AC

    2.水

    3.2%SDS

    4.水

    5.乙醇梯度20%-100%-20%,可以任選階梯型的梯度

    6.0.1M EDTA

    7.水

    7.CHARGE BUFFER

    9.水

    10.BINDING BUFFER

    可以選取其中一部分就行了,不需要每次都做完這個步驟,我認為填料的說明書上應該有寫,你可能沒注意看

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