凝膠柱的清洗問題
關鍵詞: 凝膠柱 清洗來源: 互聯網
問:最近在回收凝膠柱時(用的是鎳柱),經過多次的洗脫液繼續平衡清洗,發現還有一些很難去除的雜蛋白,不知應該用什么方法把這些難除的雜蛋白去除?
答:一般用6M鹽酸胍+0.2M AC和2%的SDS清洗
一般的柱子都是相同過程,大致順序如下
1.6M鹽酸胍+0.2M AC
2.水
3.2%SDS
4.水
5.乙醇梯度20%-100%-20%,可以任選階梯型的梯度
6.0.1M EDTA
7.水
7.CHARGE BUFFER
9.水
10.BINDING BUFFER
可以選取其中一部分就行了,不需要每次都做完這個步驟,我認為填料的說明書上應該有寫,你可能沒注意看
推薦方法