在液相分析過程中,有時會遇到樣品或標樣重現性不好.現這里有一篇這方面的文章與大家分享!
樣品或者標品的重現性不好，下面本人根據自己的經驗把原因和處理方式給大家分享一下。
不要籠統說重現性不好，要細分兩種情況：單獨樣品重現性不好;樣品和標品的重現性不好。
(一)如果單是樣品的重現性不好而標品的重現性可以的話，原因比較容易分析。問題可能出現在樣品本身上。
1)樣品降解或者分解，當你的樣品在稀釋液中不穩定，這種情況是很有可能發生的。解決辦法：改變稀釋溶液，要是遇水
分解的流動相中不能有水，必要時還等改用正向色譜。
2)樣品溶解時間不足。比如當你進第一針時候假設樣品溶解率為90%，后一針為95%，以后隨著時間延長而增加，這樣。
你重現性肯定不好。這種情況的判定比較簡單，不要肉眼看容量品是否有不容物，你的眼睛沒有那么高的分辨率，只要把
容量瓶超聲一下，看看超聲前后的對比就可以判斷。如果是這種問題，解決方法簡單，在處理樣品時加入少量的易容溶
劑，超聲5秒左右，再用你的稀釋液定容，一般就可以解決。
3)樣品稱量問題。當你做同一容量瓶的樣品取得很好的重現，而在同一樣品不同容量瓶中存在重現不好的情況。可能就是
你的稱量中出了問題。具體哪里的問題，我沒有肯定的答案，但是可以肯定的是，你必須要重新稱量，并復檢，按著要求。
可是要加倍復檢的，所以每次稱量你都必須小心。此外，還可能是容量瓶本身不準，不過這個可能性比較小，建議用
100ml容量瓶。因為容量瓶越小誤差越大，這點我做過驗證的，在國內可以作為“真理”。真理就不要在耗時費事驗證了。
(二)樣品和標準品同時出現重現性不好的情況。
這種情況比上一種可能要稍微復雜一些。但是也比較好分析。
首先，不要籠統說重現性不好。也有兩種情況，一是保留時間較好，只是響應值不好;二是兩者都不好。
如果是第一種情況，請參考(一)中的分析，這里不贅述。
如果保留時間和響應值都不好可能的原因如下：
1)柱溫的影響。柱子溫度和保留時間的關系，一般是反向的，即柱溫越高保留時間越短，反之亦然。但是柱溫不僅會對保留時間有影響，還會影響響應值也就是峰面積。一般來講保留時間提起會使峰寬變小和峰高變大，但他們兩者的對于峰面積的作用一般不會正好抵消，也就是說面積有所變化的。所以，柱溫箱是必要的。如果你還沒有趕快和老板說，如果不給
買，就說是我說的。哈哈!
2)流速和柱壓的問題。首先要知道在液相色譜中是用流速控制柱壓的，流速你要設定的，而柱壓是配合你的流速儀器自行控制的。柱壓是流速的因，流速是柱壓的果。當你系統正常運行時突然柱壓降低，這個時候流速會突然降低，樣品的保留時間會延后，當然也就造成重現性的不好了。還有柱壓波動較大的時候，也不會有好的重現性(保留時間和響應值)。
3)其他比較少見的情況。燈的能量不足。表現為，保留時間可以，但是響應值逐漸降低。解決辦法：換燈。說實在的這種情況比較少見，至少我沒有遇到過。有些色友在分析類似的問題時上來就說人家的燈可能不行了，我覺得這是很站不住腳的一種說法。首先氘燈的平均使用壽命為3000小時，每天8小時的話可以用375天(一年半使用時間)，也就是說這種情況如果成立的可能性為1/375，而且未必成立。其次，一般儀器開機時都有自檢的(國產儀器我不清楚，至少waters和agilent是有的)，自檢通過了一般工作1天是一點問題都沒有的。我曾經在自檢初次通不過情況下使用半月也沒有問題(一次不通過，關機，停一會再開機)。第三，我認為燈能量的衰減速度是隨著你燈能量降低而降低的。這個是我個人的觀點。好比100元的股票每天跌10%，第一天下跌10元，第十天下跌多少我就不算了，反正比10元少很多。扯遠了，這個觀點套用到這里就是，燈的能量低事實，不支持短短一天時間內重現性不好這個現象，也可以近似說等能量低與檢測重現性不好無關。看似比較矛盾，我的論據在反對我的論點。但是我想這就是我的態度，因為這種情況我沒有遇到過，而我推論也僅僅是推論，加之有的色友一再強調，未免心虛，故而矛盾一把吧。
結束語，
如果你遇到的問題用我提供的思路解決了，那么祝賀你。如果解決不了也不要罵我，說我誤導你浪費你的時間，其實有些時候你遇到的問題不是單一一個原因造成了，需要綜合考慮，并解決。
