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核磁共振的原理
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下一篇 2008-04-02 11:08:11/ 個人分類:基本實驗技術
NMR(核磁共振)nuclear magnetic resonance。A phenomenon in which transitionsin the magnetic energy states of the nuclei of atoms are induced when the atoms are placed in a static magnetic fieldand subjected to an oscillatory magnetic field, perpendicular to the static field, and oscillating at some characteristic radio frequency.
簡單的說就是,處于一個靜磁場中的核子(質子和中子),會由于磁場的作用而處于不同的能量狀態,當一個外界的擺動的磁場來擾動處于“平衡”狀態的核子時,吸收了能量的核子就會從不同的能級之間要遷,并再此過程中會釋放出能量。而放出的能量被檢測到之后,經過分析和計算就可以得到蛋白質內部的原子的結構信息。
進一步解釋一下:首先不是所有的原子都是有NMR現象的,也不是具有了NMR現象就可以用于蛋白結構解析。象O16,C12是沒有核磁共振現象的(偶數的質子中子和偶數的電子),象H2,N14,NMR很難分析也很少研究。只有C13,N15,H1才真正的被用于研究,并用于結構解析。所以小一點的蛋白(小于10kd)因為含有足夠的H,可以直接用來NMR分析,而更大的蛋白則需要同位素標記,就是在M9培養中,加入C13的葡萄糖,N15的NH4cl,然后誘導,從而是表達出來的蛋白中的原子都是具有NMR的C13,N15,H1。
NMR所用到的靜磁場,是磁場非常強大的靜磁場。例如750MHz的譜儀,它的靜磁場是17.5T(特斯拉),這么強的磁場是通過電磁場產生的,我們知道螺旋線圈是可以產生磁場的,NMR所用的就是處于超導狀態下的螺旋線圈中的電流產生的磁場,為了是線圈是超導,所用要將線圈放在液氦中,使溫度接近絕對零度。所以NMR要消耗大量的液氦,還有液氮(放在液氦外面)。
所以NMR是很昂貴的試驗,第一是樣品需要同位素標記,第二是儀器非常貴重。
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TAG: 原理核磁共振