聲波基質微粒噴涂器

聲波基質微粒噴涂器
 
Anal Chem. 2006 Feb 1;78(3):827-34.
Automated acoustic matrix deposition for MALDI sample preparation.
Aerni HR, Cornett DS, Caprioli RM.

本文報道了一種用于MALDI-IMS的基質涂噴裝置－－聲波基質微粒噴涂器（Acoustic Reagent Multispotter，ARM）。該裝置還實現了與MALDI-TOF-MS全自動聯用。

原理：該噴射器在溶液下方給予一定的射頻脈沖，產生聲波能量使得溶液振動，基質溶液表面拉伸成錐形結構。當能量剛剛超過一定閾能值時，基質溶液表面的錐形結構將決裂形成一個球形液滴，液滴垂直向上噴射至位于其正上方的組織切片表面。液滴形成的大小，與溶液性質和聲波能量相關。圖為其該裝置結構示意圖。
 
液滴平均體積測定：將熒光素溶解在四種乙腈/水配比體系的溶液中，水的比例分別為50，70，90和100%。熒光素濃度3.5mg/ml。將四種溶液分別裝入四個儲液器中，在一個小片的鋁箔上連續噴射2000滴，每份平行操作4次，得到16個箔帶。每個箔帶在pH 9.0, 9ml,50mmol/L Tris緩沖液中提取1分鐘，溶解每個箔帶上的熒光素。采用熒光分光光度計進行測定熒光素的量。該檢測量與液滴平均體積正相關。結果，在同樣的儀器參數條件下，50%乙腈的溶劑體系最佳。

裝置優點：
不含毛細管和噴嘴，可避免戳破組織表面。非接觸性點噴，不產生交叉污染。
產生單向噴射的液滴（180-200um），提高基質覆蓋的重復性，包括樣品之間或者不同時間的重復性。
基質溶液可以精確覆蓋于某一點，某一感興趣區域和矩陣方式覆蓋整個組織表面。
以不同的噴射頻率連續的儲存基質，不但有效的提取組織中的蛋白，而且蛋白移位程度也大大降低。
噴射參數根據基質/分析物的比率進行微調。
可以改變霧滴的尺寸，大大提高成像分辨率。

缺點：如果液滴尺寸太小，蛋白共結晶不充分，則不易于質譜均勻采樣，難以解吸大蛋白分子。

(翻譯：軍事醫學科學院 許彬，劉念，楊帆)