液相色譜法測定穿心蓮制劑中脫水穿心蓮內酯的含量

上一篇 / 下一篇 2010-04-30 14:46:26/ 個人分類：液相色譜法

　　【摘要】目的測定穿心蓮膠囊中脫水穿心蓮內酯的含量。方法采用HPLC法，色譜柱:AlltimaC18柱，流動相:甲醇:水(60:40)，檢測波長:270nm，流速:1.0ml/min。結果在線性范圍內，脫水穿心蓮內酯的線性關系良好，平均回收率為99.8%。結論：方法簡便、靈敏、準確、樣品處理簡便易行，可作為穿心蓮制劑中的質量控制方法。

　　穿心蓮為爵床植物穿心蓮[AndrographisPaniculata(Brun.f.)Nees]的干燥地上部分。具有清熱解毒，抗菌，抗蛇毒等功效。主要含二萜類內酯化合物，如穿心蓮內酯、脫水穿心蓮內酯等成分。本研究采用了HPLC法測定了穿心蓮極細粉膠囊(以下簡稱穿心蓮膠囊)中脫水穿心蓮內酯的含量，現報道如下。

　　1 儀器與材料

　　1.1 儀器 Agilent1100系列高效液相色譜儀;超聲波清洗器(上海超聲波儀器廠)。

　　1.2 材料

　　脫水穿心蓮內酯對照品(供含量測定用，中國藥品生物制品檢定所);穿心蓮膠囊由廣西錦亞制藥廠提供;甲醇為色譜純。

　　2 方法

　　2.1 色譜條件

　　色譜柱:AlltimaC18(150mm×4.6mm，5μm);流動相:甲醇:水(60:40);檢測波長:270nm，流速:1.0ml/min，柱溫:25℃。理論塔板數:按脫水穿心蓮內酯峰計算不低于2000。

　　2.2 對照品溶液的制備

　　精密稱取脫水穿心蓮內酯對照品10mg，置于10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品儲備液。精密量取上述溶液1.0ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

　　2.3 線性關系考察

　　精密吸取對照品溶液5、10、15、20、25、30μl注入色譜儀，以對照品基線構成之面積稱峰面積。A=×σ×h=2.507σh=1.064Wh/2h>峰面積為縱坐標，進樣量為橫坐標，繪制標準曲線。回歸方程;Y=-149.7+55568.6X，r=0.9998(n=6)，表明脫水穿心蓮內酯在0.2～1.2μg范圍內線性關系良好。

　　2.4 精密度試驗

　　精密吸取對照品溶液10μl，連續進樣6次測定，其峰面積的RSD為0.69%。

　　2.5 穩定性試驗

　　精密吸取同一供試品溶液10μl，分別在0、2、4、6、8、10h進樣測定，峰面積RSD=1.1%，表明室溫條件下供試液在10h內穩定。

　　2.6 重復性試驗

　　取同一批樣品5份，按樣品含量測定項下依法平行操作，測定每份樣品中脫水穿心蓮內酯的含量，結果RSD=1.25%.

　　2.7 加樣回收率試驗

　　精密稱取已知含量的同批樣品5份，精密加入一定量脫水穿心蓮內酯對照品，按樣品含量測定項下測定，平均回收率為 99.8%，RSD為1.87%。

　　2.8 樣品含量測定

　　取本品10丸，研碎，混勻，精密稱取1.0g，置100ml量瓶中，加入甲醇 50ml，超聲30min，加甲醇稀釋至刻度。過濾，取濾液用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續濾液進樣10μl，按上述色譜條件測定。

　　3 討論

　　脫水穿心蓮內酯是穿心蓮中所含的主要成分，《中國藥典》2000版一部穿心蓮項下脫水穿心蓮內酯的含量測定使用薄層掃描法，而本試驗選擇液相色譜法，實驗結果表明，該法具有快速、分離度好、重現性好、靈敏度高的特點，可用于穿心蓮制劑的質量控制方法。