測beta-激動劑碰到的問題

最近在做b-XFJ，20多種吧。按食品獸殘檢測的套路走，先摸質譜條件，再接上液相摸色譜條件。質譜條件沒特別的，按下不表。接上液相的時候，怪事出現了。先介紹色譜條件：流動相乙腈+水，含0.1%甲酸，梯度洗脫，色譜柱：waters atlantis dC18,2.1mm*150mm*5um，流速0.2mL/min，是我做液質常用的條件。標準用甲醇稀釋。平衡好儀器，開始進樣，從進第一針標準開始，在2min左右，20多種物質中起碼有10來種成分出峰了，峰型很尖銳，感覺就是這些成分沒保留，隨溶劑出來了，但隨之而來的是，到10來分鐘的時候，這些已經出過峰的成分又開始出峰了，不過峰型沒2分鐘的尖銳，峰有分裂。懷疑管路污染，因為剛摸質譜條件用的濃度比較高。沖洗柱子及管路一晚上，離子源也一并洗了。第二天再進標準測定，情況與昨天有所不同了，2分鐘的峰時高時低，低的時候，后面出的峰也隨之會稍微高了點，這種高低變化沒什么規律。以前也碰到過類似情況，就是溶劑峰的位置也出峰的情況，但走一段時間就好了。也找不到合適的辦法，決定換根新柱子再來，但結果仍是這樣。提高或降低標準的濃度，該物質對應出的兩個峰也相應升高或降低，說明這兩個峰是同一種成分是無異議的，但一種成分何以會出兩個保留時間差別那么大的峰？百思不得其解啊。難道我建的方法有誤？幸虧我幾年前建立過一個只測三種bXFJ的方法，決定把舊方法拿來試試，結果也不是兩年前的結果了，同樣出兩個峰。難道是標準有問題，這些標準可是最近花了大價錢買的，有幾種是費了好大的經才買到的啊。電話問也做這方面工作的師弟，他說也碰到過，上次考核萊克多巴胺，以前做得好好的，但偏偏做考核樣時突然出現兩個峰，最后把流動相由乙腈改為甲醇就好了。聽他一說，感覺換流動相，但無效。標準改用乙腈、50%乙腈、50%甲醇稀釋，都沒任何變化。做了幾天，都快讓人失去信心了。那天突然看到快用完的一瓶甲醇，想到配標準用的甲醇，難道配標準的甲醇有問題？有了這個想法的時候，就將標準儲備液直接用水稀釋了一個，準備再做最后一次就休息了。結果偏偏這個絕望的做法讓我找到了原因，用水稀釋的標準居然在2分鐘沒任何峰出現，而后面的峰型也漂亮了，不再有分裂峰出現了，居然是稀釋標準的方式問題？馬上用新開的甲醇、乙腈，比較甲醇、50%甲醇、乙腈、50%乙腈、水等幾種溶劑稀釋標準來測定，結果證明，只有用水稀釋的結果才讓人滿意。困擾了很多天的問題終于解決了。溶解標準和樣品的溶劑影響如此之大，我還是第一次碰到。我以前一直都是這樣做的（優化方法條件的時候，圖方便，都是用甲醇或乙腈稀釋標準的），出現這種情況，看來以后摸條件要小心了。

用甲醇、乙腈配的標準結果（因為50%和100%的色譜圖都差不多，就只貼一張了）。

甲醇：

乙腈：

水：

甲醇配的標準

乙腈配的標準

水配的標準