氨基柱的使用

        氨基柱在含水量多的情況下是很不穩定的。也不宜在強酸的環境下使用。用的是緩沖液則先用水/乙腈清洗再用乙腈，.氨基住其本質屬于正相柱，使用氨基柱除了采用正相系統作為流動相以外，一般還采用乙腈-水作為流動相，但是要求乙腈的含量不得低于80%，含水過多的流動相對氨基柱有損害，一般盡量不要用含水過多流動相。建議用小流速的異丙醇沖洗過夜試試。氨基柱是同時可以用于正相條件和反相條件的，這一點很多用戶都已經知道；但是要注意到的是：正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的，對這一點的忽略可能會帶給使用者一些麻煩。

        對于新購買到的柱子，首先請注意打開分析測試說明書，了解柱子的保存溶劑。如果保存溶劑與你將要使用的流動相極性不同不會互溶，請先用異丙醇過渡。過渡過程中注意因異丙醇粘度較大，會導致柱壓很高，適當調低流速即可。如果要使用的流動相中還含有緩沖鹽類，建議在用分析流動相之前，先用不含緩沖鹽的同比例流動相過渡，這樣可避免緩沖鹽在分析柱內的析出。

柱效檢測：

        我用于判斷一個用戶是否有經驗的指標之一，是用戶是否習慣配制一些柱效檢測標準溶液。說到柱效檢測，我可以向大家提供一個方法，而且很通用，你也可以用同樣的標準溶液和流動相來檢測硅膠柱和氰基柱。

流動相：

10％乙酸乙酯＋90％正己烷 流速1.0

標準溶液：

乙苯（如乙苯找不動就用甲苯代替唄）＋苯甲酸甲酯

檢測波長254nm

        這個方法特別適用于新購柱子（新購柱子往往保存在正相溶劑中）時即進行檢測，如有問題，可及時與供應商溝通。也適合在柱子在準備放置相當長一段時間之前進行充分清洗后進行檢測作為記錄留檔。在平常的使用過程中，如果分析物是固定重復的，我們當然可以從對分析物的分離分析情況來作出判斷；但如果分析物和分析條件不同時，定期檢測柱效可以避免柱效下降導致分離不佳再分析查找原因這樣浪費人力物力的過程。不過特別要注意的是，當氨基柱（或氰基柱）在反相條件中使用時，如用該條件檢測，請注意流動相的換相過渡問題。

       1. 氨基柱的使用：

        需要注意的是，氨基柱的鍵合官能團氨丙基要比C18,C8柱的鍵合官能團C18,C8要容易水解，所以首先要做好其使用壽命稍遜的心理準備，特別是當你的使用條件是反相條件下時。

        反相條件下使用時，要特別注意控制PH值范圍，PH值越低越有發生水解的危險，流動相中水的比例越高當然也越有發生水解的危險。所以，在使用后以及準備長時間放置該柱時，必要的清洗和將氨基柱保存于純的有機溶劑中是很好的保養措施。

        有一種情況是，當使用氨基柱進行酸性物質如果汁的分析時（分析其中的糖份），酸性物質的存在意味著質子的存在，可能會使略帶負電荷的氨基官能團質子化，導致使用一段時間后對于某些類的分析物保留性質有所改變或表現在柱效下降。這時，Kromasil專家所給的建議是：用5-10倍的柱體積的含0.5- 1.0％NH3的50-50乙腈-水溶液沖洗該柱（沖洗后當然要再用不含堿的流動相洗去多余氨），之后再進行分析這類酸性分析物時建議在流動相中略微添加少許氨如0.1％。

         2.氨基柱的清洗

        簡單說起來，正相條件下使用的氨基柱你就參照硅膠柱的清洗方法；反相條件下使用的氨基柱你就參照C18的清洗方法。

        3.平時在正相條件下使用：

        首先用50倍柱體積的異丙醇清洗，因異丙醇粘度較大可適當放低流速；之后，用50倍的甲醇清洗；之后，用異丙醇過渡回到平常使用的正相流動相，即可。

        4.平時在反相條件下使用：

        緩沖鹽應及時沖洗，以及不能直接用純甲醇沖洗緩沖鹽等，屬常識就不作特別交待了。

        用50倍純甲醇沖洗；之后，用異丙醇過渡后，用二氯甲烷沖洗色譜柱；之后，再用異丙醇過渡回來到甲醇條件下。

        這些清洗方法，主要是針對當樣品中有雜質逐步吸附累積到填料上時的處理方法，色譜柱表現行為為諸如柱壓增高柱效降低等