血鉛測定常用方法
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下一篇 2009-08-20 15:51:11
1、雙硫腙絡合比色法
廣泛應用于測試其它方法的準確性。樣品為10ml血、25ml尿或組織顆粒等等,通過酸氧化而灰化以去除有機物。灰化之后,式樣再重新溶解于酸化水中。隨后將PH調整到9—10,再加氰化物以除其他金屬離子的干擾。最后樣品與雙硫腙作用生成雙硫腙鉛——紅色絡合物。此絡合物被氯仿萃取,并用分光光度法于波長510nm處測量。
2、原子吸收光譜法(ASS)
樣品的前處理有以下幾個特點:
(1)樣品的消化或處理目的是使鉛從樣品基體中分離出來;(2)鉛離子被吸入火焰或經電熱作用而還原成原子態;(3)以鉛的特征共振頻率283.3nm下的光吸收來進行分光光度定量。常用鉛吸收峰的高度或峰面積來計算鉛濃度。
[1]經典的ASS法有與雙硫腙比色法類似的用酸氧化灰化過程。在樣品處理后,離子鉛溶液被吸入空氣—乙炔火焰,在這里,鉛離子被還原成原子狀態,通過測定鉛在283.3nm下的吸收光來定量。
[2]微量血火焰ASS法最近已廣泛應用于血鉛分析。在Delves杯法中,取10ul指血加到裝有用來不完全氧化樣品的過氧化氫的特殊鎳杯中。在樣品預處理后,杯被插入ASS火焰上測定鉛。
[3]電熱的ASS法,又叫石墨爐和碳棒技術。電熱ASS法程序是將石墨管或炭棒放置在ASS光軸上,這個管用氮和與大氣隔開,在注入樣品后,用電阻把石墨或碳棒連續加熱達100℃干燥溫度,400℃的灰化溫度,然后升到2000--2500℃原子化溫度(這是還原反應),這時光路中形成一個高濃度的Pb,這些原子通過擴散而迅速逸散。儀器輸出鉛在280.2和283.3nm吸收率的信號(一種在幾秒鐘之間的瞬息信號),同時以此用于定量。
3、陽極溶出伏安法
在陽極溶出伏安法(ASV)中,血樣或尿樣中的鉛離子,首先被加有負電位的工作汞還原成元素鉛,還原的鉛則沉淀在汞電極上。Pb2++2e→Pb0(沉淀在汞電極上),在預選時間以后,工作電極電位更加向正值移動,因此,引起來自汞電極的鉛再氧化,氧化引起正電流,此電流強度與鉛的濃度成正比并被測量。
Pb0(從汞電極)→Pb2++2e
ASV技術已成為一種可靠的和重現性好的用于微量血樣的方法。環境科學協會(ESA)設計使用一種高效的汞-石墨復合電極,這種電極被ESA裝在鉛的半自動分析儀器中,來測定在汞-石墨電極上溶出鉛時一個特定的電壓“窗口”產生的電流,這時的電流變化被繪在記錄儀,由此獲得正確的值。通常用鉛峰的峰面積來計算濃度,而峰高同樣是可以應用的。
血ASV法作為常規分析已用于兒童鉛接觸、職業性工人鉛接觸以及鉛中毒人群治療期間生物樣品的監測和研究中。
此外,還有幾種用于測定樣品或骨骼中鉛的非常規的方法,這些方法包括電子微型探針、X射線熒光技術、中子活化分析和質譜分析等。所有這些方都需要用昂貴的儀器和高水平的分析人員。
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