異硫氰酸熒光素標記的抗體方案

FITC（熒光素異硫氰酸酯）可以與各種抗體蛋白結合，而不會失去其對關節蛋白的特異性。一旦結合，抗體在堿性溶液中表現出強烈的黃綠色熒光。相應抗原的定性、定位或定量檢測可以通過熒光顯微鏡觀察或流式細胞術分析進行。它被用于醫學、農業和獸醫科學等各個領域，用于快速診斷由細菌、病毒、寄生蟲和其他病原體引起的疾病。

艾美捷異硫氰酸熒光素：

Cat #: B-CHM100

規格：100 mg

儲存：儲存溫度為-20°C，避光保存。

配方：C₂₁H₁₁NO₅S

兆瓦：389.38

純度：≥95%（HPLC）

光譜特性：Ex/Em=490/525 nm

外觀：黃色粉末

運輸和儲存：

儲存條件：儲存溫度為20°C，避光。

穩定性：在適當的儲存條件下穩定至少12個月。

異硫氰酸熒光素標記的抗體方案：

（1） 將待交聯的蛋白質（濃度：1mg/mL）在交聯反應緩沖液中在4°C下透析三次，將pH調節至9.0。交聯緩沖液的制備：溶解7.56 g NaHCO3，1.06 g Na?CO3和7.36g NaCl在水中的溶液稀釋至1L的最終體積。

（2） 將FITC以1 mg/mL的濃度溶解在二甲基亞砜中。為每次交聯反應準備新鮮的FITC溶液，并避免暴露在光下。

（3） 將FITC緩慢添加到抗體溶液中，比例為P：F（蛋白質：FITC）=1 mg：150μg。輕輕混合溶液，同時加入FITC，以確保與抗體均勻混合。讓反應在黑暗中在4℃下進行8小時。

（4） 添加5 mol/L NH?Cl最終濃度為50 mmol/L，在4°C下停止反應2小時。

（5） 將綴合物相對于PBS溶液透析至少四次，直到透析液變得清澈為止。

（6） 交聯材料的特性：

蛋白質濃度（mg/mL）=[A280-0.31×A?gs]/1.4

F/P比：3.1×A?gs/[A280-0.31×A?gs]。該值應介于2.5～6.5之間。

（7） 將FITC蛋白偶聯物儲存在pH 7.4的PBS中，補充0.1%的NaN3和1%的BSA，在4°C的黑暗中儲存。

https://www.amyjet.com/products/B-CHM100-100mg.shtml