CENP-E運動結構域蛋白（重組人）的用途及生物活性

人類CENP-E（KIF10）的保守運動域在原核系統中表達。重組蛋白在氨基末端含有GST標簽，組合分子量為71 kDa。該蛋白在微管激活的ATP酶活性測試中已被確定為具有生物活性。蛋白質以白色凍干粉末形式提供。

艾美捷CENP-E運動結構域蛋白（重組人）的用途：

微管活化ATP酶活性的測定

鑒定/表征影響運動ATP酶活性的蛋白質或小分子

鑒定/表征影響驅動蛋白運動性的蛋白質或小分子

鑒定/表征影響運動/微管相互作用的蛋白質或小分子

蛋白質純度：

是通過在12%聚丙烯酰胺凝膠上掃描考馬斯藍染色蛋白質的密度測定法確定的。所有驅動蛋白運動域的純度均為>85%。有關純度示例，請參見圖1。

生物活性 - 微管活化的 ATP酶測定通過使用：

驅動蛋白ELIPA測定試劑盒（貨號#BK060）監測實時游離磷酸鹽的生成來測量CENP-E ATP酶活性。該測定基于330-氨基-360-巰基-2甲基嘌呤核糖核苷（MESG）在無機磷酸鹽（Pi）存在下催化轉化為6-氨基-7-巰基-2-甲基嘌呤時發生的吸光度偏移（6 nm - 7 nm）。一個Pi分子將在基本上不可逆的反應中產生一個分子的2氨基-6-巰基-7-甲基嘌呤。因此，360nm處的吸光度與驅動蛋白ATP酶反應中產生的Pi量成正比。在下面概述的條件下，CENP-E 微管激活的 ATP 酶活性的 Vmax 為每毫克 CP900 每分鐘產生的 >01 nmoles ATP（圖 2）。使用10分鐘終點測定（驅動蛋白ATP酶終點測定試劑盒，貨#BK053）的ATP酶速率為每毫克CP900每分鐘>01 nmoles ATP（數據未顯示）。

圖1：驅動蛋白運動域蛋白的純度。BimC（BM01），CENP-E（CP01）和Eg5（EG01）在SDS-PAGE凝膠上運行，并用考馬斯藍染色。

圖2：使用驅動蛋白ELIPA檢測試劑盒（貨號#BK060）的CENP-E微管激活ATP酶活性

https://www.amyjet.com/products/CP01-A.shtml